葉綠素分離及提取方法對(duì)比分析

 

 1、膜分離技術(shù)。

用陶瓷膜微濾(MF)對(duì)浸提液進(jìn)行精濾提純，再用反滲透膜(R0)濃縮過(guò)濾液。這種工藝以膜分離技術(shù)為主體，替代了傳統(tǒng)的酒精提純和蒸發(fā)濃縮，工藝過(guò)程簡(jiǎn)單、色素溶液基本處于常溫操作狀態(tài)，既節(jié)約能源，又保證了色素產(chǎn)品的質(zhì)量。

2、干燥法提取葉黃素。

研究出一種新型轉(zhuǎn)筒式干燥機(jī)，用來(lái)干燥和捶擊金盞花或者萬(wàn)壽菊花瓣，可以從中提取葉黃素。當(dāng)捶擊比率不同時(shí)，捶擊效率就在70%～90%之間波動(dòng)。葉黃素的多少?zèng)Q定于干燥時(shí)間長(zhǎng)度。但在相同的干燥時(shí)間里，70℃下干燥提取的葉黃素含量比60℃下提取的葉黃素含量要少。

 3、高效液相色譜分析法提取。

以二氯甲烷(22.5mL)+乙腈(9.5mL)+甲醇(67.5mL)+水(0.5mL)為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min。使用光度檢測(cè)器(波長(zhǎng)為450nm)檢測(cè)分離后的類胡蘿卜素和葉綠素。樣品進(jìn)樣體積為20μL。在此條件下，葉黃素、葉綠素b、葉綠素a、番茄紅素(lycopene)、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素的保留時(shí)間分別為3.0、4.9、6.6、12.1、14.6和15.3min。取螺旋藻的培養(yǎng)液(通過(guò)測(cè)定光密度(560nm)得出培養(yǎng)液中螺旋藻干重于離心管中，離心后棄去溶液，加水洗滌后，加入2mL體積分?jǐn)?shù)為90%丙酮水溶液，置于超聲波發(fā)生器水浴上，使螺旋藻破碎。離心后取上層提取液用高效液相色譜法測(cè)定葉黃素/玉米黃質(zhì)、β-胡蘿卜素及葉綠素a的含量，其最高含量分別為：1.65μg/mg，2.15μg/mg和21.4μg/mg。

4、改良的高效色譜分析法。

采用美國(guó)Waters公司的680型自動(dòng)程序梯度控制器，501型高壓液相泵，M-490型可編程序紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器，730型數(shù)據(jù)處理器，記錄保留時(shí)間和峰面積，走紙速度為2cm/min。選擇最佳的色譜分離條件是色譜分析中的關(guān)鍵，本方法選用兩種流動(dòng)相A液和B液，采用線性梯度洗脫分離色素組分。用改良的高效色譜分析法分析葉黃素循環(huán)組分，具有快速、準(zhǔn)確、分離度好以及重復(fù)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。

5、玉米黃漿水中提取玉米黃色素。

選用己烷質(zhì)量分?jǐn)?shù)高達(dá)74%～80%的抽提溶劑油，根據(jù)液一固萃取原理，通過(guò)液固二相存在濃度差時(shí)的分子擴(kuò)散作用，利用泵循環(huán)施以外力時(shí)的對(duì)流擴(kuò)散作用，達(dá)到色素浸出的目的。再通過(guò)真空濃縮精制獲得液態(tài)色素產(chǎn)品，或者添加輔料獲得固態(tài)色素產(chǎn)品。

6、大豆中葉黃素的解析。

在酸和堿性稻殼灰中大豆油色素(葉黃素)解析時(shí)，連續(xù)的異丙醇/己烷的洗滌，增加溶液極性可提高葉黃素的解析，表明競(jìng)爭(zhēng)吸附很大程度上決定于溶液的極性。但是當(dāng)加入2%異丙醇洗滌時(shí)，用多種提取法解析出來(lái)的葉黃素會(huì)減少。葉黃素吸附的量越多必然伴隨著更多的葉黃素的解析。這說(shuō)明酸性環(huán)境比堿性環(huán)境更有利于解析。

7、葉黃素產(chǎn)品生產(chǎn)工藝。

以萬(wàn)壽菊花中用正己烷萃取而得的葉黃素為例：

皂化時(shí)氫氧化鈉水溶液w(NaOH)=0.17。

萬(wàn)壽菊(Marigold)是提煉葉黃素及類胡蘿卜素的主要原料，其中黃色色素含量平均每公斤不低于12克，這種色素是無(wú)公害的天然色素。